
一、“大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒”简介
【检测方法】:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【产品性状】:96T/48T,盒装液体(两种统一规格)
【贮藏条件】:2-8°C
【有 效 期】:二年,我公司Elisa试剂盒均为X新批次,可放心购买。
【主要成分】:酶标板,试剂,标准品等。
【种 属】马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
【产品单价】(具体折扣来电咨询),可免费代测,含税含运费。
【标 本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
注:标本必须为液体,不含沉淀。
二、“大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒”检测概述
ELISA(酶联接免疫吸附反应分析)是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。
实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。
三、实验原理:
结合在固相载体表面的抗原或抗体与受检标本(抗原或抗体)起反应。用洗涤的方法洗去未结合的抗原或抗体。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,根据呈色的深浅进行定性或定量分析。根据实际的应用方法,可以分成以下几种:
双抗夹心 ELISA:将捕获抗体包被在固相载体上,封闭后加入待检抗原,温育后加入酶标检测抗体,捕获抗体和检测抗体可以是针对不同表位的两种单抗,也可以是针对同一抗原的一种单抗与一种多抗,但是检测抗体需要经过酶标。
竞争ELISA:用待检抗原或抗体去干扰已经预先设计好的体系,X终显色的结果与待检抗原或抗体的干扰程度成负相关。主要应用于只有一个抗原表位的蛋白检测。
多因子ELISA检测技术:多重ELISA芯片技术通过在96孔板的每个孔中以阵列的形式植入1~25种捕获抗体,随后像ELISA一样操作,通过化学发光(HRP酶)和荧光燃料(红外)来检测。
受刺激的细胞产生的细胞因子是短暂的,并且不同细胞因子基因表达的动力学是变化的。通过ELISA实验只能检测到的免疫反应性的细胞因子蛋白的含量,而这并不能完全代表细胞因子的生物活性的水平。例如,使用抗细胞因子抗体的一种ELISA不能区别如TGF-β1的细胞因子蛋白是无活性的前体形式还是有活性的成熟蛋白。此外,一种ELISA可以检测部分降解的细胞因子蛋白,它们仍有免疫反应性(例如至少可识别两个表位),当时它可能却丧失了它们的生物学活性。
四、“大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒”技术流程
双抗体夹心法(检测未知抗原)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做X孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以X对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
间接法(检测未知抗体)
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做X、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标X二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,X后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以X对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
五、ELISA试剂盒X点:
我司共有14000余种ELISA试剂盒物种涵盖Human,Mouse,Rat等,畅销品种具备以下X点:
极高品质—高品质的抗体和试剂是ELISA试剂盒的基础
X特异—特异检测目标分子,结果X可重复
高度灵敏—可检测到pg/mLX别的目标
种类齐全—可覆盖人、大鼠、小鼠、棉鼠、猕猴、猪、马、犬和猫等多个种属
X化设计—可拆卸式96孔板(12X8),为血清、血浆、尿样和细胞培养物样本检测进行X化
六、教你如何鉴别【大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒】真伪
1、看产品包装
没有任何的生产地址、联系方式等信息,却挂着如R&D等大公司的LOGO,这种产品有问题了连个投诉的地方都没有,如果投诉,供货方会迅速答应赔付,但您得到的可能是换了包装的同样的东西。
2、看公司网站
有些打着国外原装旗号,整个公司网站为英文页面,实际注册IP地址在中国。如果写着国外的地址,让你国外的朋友实地去看一下!
3、做交叉验证
拿对方提供的几个种类的试剂盒,把里面的关键组份相互替换做做实验,如果交叉严重,只能说明是一种原料生产的试剂盒贴了不同的标签。
4、看价格
价格低得离谱,却打着进口R&D等大公司原料分装,我们自己核算一下成本,这种低得离谱的价格连原料都买不到,哪家公司会亏着本卖东西?